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Versuche Prof. Lindl
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Versuch 01/00 München, am 18.01.2000
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Hefewachstum und Glukoseverbrauch mit Zugabe von H2SO4 (10%ige Stammlösung) in der Endkonzentration D6 ohne bzw. mit Erwärmung des Aqua bidest. Auf 40°C bei der Herstellung der Verdünnungsstufen.
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Glucosebestimmung (in mg/dl):
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Zeit ( Min. )
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aerob ohne H2 SO4 = Kontrolle
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aerob 10% H2 SO4 D6 Endkonz.
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aerob 10% H2 SO4 erwärmt D6 Endkonz.
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0
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550
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556
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544
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60
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40
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151
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144
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120
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<15
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<15
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<15
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180
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<15
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<15
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<15
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Zellzahlbestimmung (OD600):
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Zeit (Min.)
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aerob ohne H2 SO4 = Kontrolle
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aerob H2 SO4 D6 Endkonz.
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aerob H2 SO4 erwärmt D6 Endkonz.
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0
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8,4
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8,4
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8,4
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60
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10,6
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10,8
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11,4
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120
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12,2
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11,5
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11,7
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180
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13,0
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12,5
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12,5
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Ys/x = Verbrauchtes Substrat Biomasse
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1. Auswertung nach 0 min (Ausgangswerte)
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Aerob ohne H2SO4 = Kontrolle
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Aerob H2SO4 D6 Endkonz.
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Aerob H2SO4 Erwärmt D6 Endkonz.
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Ys/x gesamt
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65,746
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66,190
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64,70
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Ys/x relativ
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100%
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98,92%
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101,9%
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2. Auswertung nach 60 min
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Aerob ohne H2SO4 = Kontrolle
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Aerob H2SO4 D6 Endkonz.
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Aerob H2SO4 Erwärmt D6 Endkonz.
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Ys/x gesamt
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3,77
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13,98
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12,63
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Ys/x relativ
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100%
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370%
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335%
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3. Auswertung nach 120 min.
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Aerob ohne H2SO4 = Kontrolle
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H2SO4 D6 Endkonz.
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Aerob H2SO4 Erwärmt D6 Endkonz.
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Ys/x gesamt
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1,229
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1,30
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1,28
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Ys/x relativ
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100%
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100,75%
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96%
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4. Auswertung nach 180 min.
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Aerob ohne H2SO4 = Kontrolle
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H2SO4 D6 Endkonz.
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Aerob H2SO4 Erwärmt D6 Endkonz.
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Ys/x gesamt
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1,15
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1,20
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1,20
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Ys/x relativ
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100%
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95,8%
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95,8%
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Der Versuchsansatz, der ohne H2 SO4- Zusatz kultiviert worden war, wurde als Basiswert mit jeweils 100% angesetzt (Kontrolle). Ein höherer Wert bedeutet bessere Glukosewertung, ein niedrigerer Wert bedeutet schlechtere Verwertung der Glukose. Hierbei wird prinzipiell davon ausgegangen, dass die Hefen bevorzugt Glykolyse machen, solange Glucose vorhanden ist.
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Interpretation bzw. Ergebnis:
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Die Interpretation der Daten lässt nichts offen: Bei 60 min ist bei nahezu gleicher Zellzahl die Glucoseerweiterung mit Zugabe von H2SO4 um den Faktor 3,7 (D6- Verdünnung mit norm. Aqua bidest. bzw. Faktor 3,35 ( D6 Verdünnung mit auf 40°C erwärmter Aqua bidest.) Dies bedeutet im Klartext, dass die Hefezellen die Ausbeute um diesen Faktor gesteigert haben, dies kann nur durch den mitochondrialen Glukosemetabolismus geschehen.
Die Daten sind eindeutig und signifikant.
Ein signifikanter Unterschied zwischen de beiden Aqua bidest. –Behandlungen ist nicht zu sehen, auch wenn die Effizienz bei den Werten der D-6-verdünnung mit erwärmten Aqua dest. etwas schlechter ist
Gez.: T. Lindl
Durchführende des Versuches: Frau Dr. med. vet. Ingrid Weichenmeier.
Prof. Dr. Toni Lindl Institut für angewante Zellkultur Dr. T. Lindl GmbH Balanstr. 6 81669 München Tel.: 089-487774 Fax: 089-487772
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